搜索
返回
顶部
首页 > 热点文章 > 化学试剂 > 正文
【荧光探针专题】基于快速响应的红色 ONOO−荧光探针及其细胞成像
引用本文：张春香，张向阳，申有名，等. 基于快速响应的红色ONOO−荧光探针及其细胞成像[J]. 化学试剂，2023，45（4），1-7.

DOI:10.13822/j.cnki.hxsj.2022.0915



背景介绍


过氧亚硝酸盐（ONOO−）作为一种重要的生物活性氧（ROS），由体内一氧化氮和超氧化物的扩散控制反应产生。正常浓度范围的ONOO−对细胞功能产生积极影响，如信号转导、氧化还原稳态和免疫反应。截至目前为止，有许多分析方法用于ONOO−检测，如紫外-可见光谱、电子自旋共振、电化学分析、免疫组织化学、和荧光法。相比之下，荧光法具有非入侵、选择性高、响应快速、超时空成像等优势，被认为是一种非常有效的方法。


本文亮点


1

合成了一种红色ONOO−荧光探针HBSCN，展现出明显的荧光增强信号；

2

该探针能够在生理pH下快速地检测ONOO−，且对ONOO−具有较大的Stokes位移和较高的选择性；

3

HBSCN能够用于活细胞内ONOO−成像，具有潜在的生物应用价值。




内容介绍


图片

1  实验部分

图片

2  结果与讨论

2.1  光谱表征

首先，借助紫外吸收光谱考察HBSCN对ONOO−识别能力。如图1所示，在PBS缓冲溶液（V(DMF): V(H2O)=1：9, 10 mmol/L, pH 7.4）中，HBSCN自身在425 nm处有一个明显的紫外吸收峰。



2.2  反应机理

通常，缺电子双键在强氧化剂的作用下容易发生断裂，生成醛或者羧酸化合物。通过上述的实验可以看出，探针HBSCN加入ONOO−后，其紫外光谱和荧光光谱均发生了明显的变化，溶液颜色也相应的改变，推测HBSCN中C=C键在ONOO−作用下可能发生了裂解。
2.3  pH影响
pH值是一个重要的实验参数。为探讨HBSCN是否能够在生物体中实现对ONOO−的检测，在不同的pH溶液中，我们测试了HBSCN对ONOO−响应情况。如图5所示，在pH 4 ~ 11之间，HBSCN自身的荧光强度几乎不变，说明HBSCN在不同的pH值下具有较好的稳定性。

2.4 反应时间考察
HBSCN 对ONOO−的响应时间是另外一个重要的实验参数。为探讨HBSCN对ONOO−检测的动力学，我们测试了HBSCN在不加和加入ONOO−后荧光强度变化与时间的关系，如图6所示，HBSCN本身的荧光强度不随时间的变化而变化。

图片

3  结论

基于不饱和C=C双键氧化断裂反应，我们成功构建了一种简单有效的红色ONOO−荧光探针HBSCN。在ONOO−存在下，探针的荧光显剧增强，其荧光强度与0~20 μmol/L的ONOO−表现出良好的线性关系，溶液颜色由无色变成红色，可实现比色荧光检测。


版权所有：全国化学试剂信息中心 北京国化精试咨询有限公司
技术支持：北京与仁科技服务有限公司 QQ：569942643
ICP备案号：京ICP备13010415号    京公网安备11010202010772