引用本文:叶廷秀，杨林，罗红元，等. 过氧亚硝基传感检测的荧光探针合成与应用[J]. 化学试剂, 2023, 45(11):45-50.
DOI:10.13822/j.cnki.hxsj.2023.0353
背景介绍
文章亮点
1.提供了一种基于硼酸酯为识别基团的小分子荧光探针TPE-BCO的合成方法，并考察了TPE-BCO用于体外ONOO-检测的可行性及检测条件；
2.通过核磁共振氢谱、高分辨质谱表征了TPE-BCO的结构，研究了TPE-BCO的光谱性质，探讨了TPE-BCO用于ONOO-检测的响应机理；
3.为用于ONOO-检测的小分子荧光探针合成及其在ONOO-检测中的应用提供了新思路。
内容介绍
1 实验部分
1.2 实验方法
1.2.1 TPE-BCO的合成
在25 mL的单口烧瓶中加入34.8 mg（0.1 mmol）1-（4-羟基苯）-1,2,2-三苯乙烯（TPE-OH）、34.8 mg（1.45 mmol）氢化钠（NaH）以及5 mL N,N-二甲基甲酰胺（DMF），25 ℃充分搅拌反应0.5 h，随后加入35.5 mg（0.12 mmol）4-溴甲基苯硼酸频哪醇酯，继续反应24 h。
将滤液在室温下旋蒸至无溶剂，置于真空中干燥，得到除去溶剂的粗产品。用硅胶柱层析法（V（石油醚）∶V（CH2Cl2）= 5∶2）分离纯化粗产品，旋蒸后得到0.0274 g纯的探针TPE-BCO，产率78.4%。具体合成路线如图1所示。
1.2.2 溶液的配制
ONOO-溶液的配制[32]：分别取1.5 mL（0.7 mol/L）H2O2溶液和1.5 mL（0.6 mol/L）HCl溶液于烧瓶中，快速混入3.0 mL（0.6 mol/L）NaNO2溶液和3.0 mL（1.5 mol/L）NaOH溶液，在室温下快速搅拌得到ONOO-溶液。
2 结果与讨论
2.1 TPE-BCO的紫外-可见吸收光谱
通过扫描获得了1.0×10-5 mol/L TPE-BCO的吸收光谱以及加入1.4×10-5 mol/L ONOO-后的吸收光谱（图2）。
2.2 TPE-BCO的荧光光谱
TPE-BCO的荧光激发光谱和发射光谱图如图3所示。为了便于比较，实验同时扫描了TPE-OH的荧光光谱图。
2.3 TPE-BCO在PBS缓冲溶液中的稳定性研究
以330 nm为激发波长，考察了 1.0×10-5 mol/L TPE-BCO在磷酸缓冲溶液（PBS，0.01 mol/L，pH 7.4）中的稳定性（图4）。
2.4 TPE-BCO用于ONOO-检测的可行性研究
2.4.1 响应时间
实验以1.0×10-5 mol/L TPE-BCO与 1.4×10-5mol/L ONOO-在不同响应时间的荧光强度（λ=465 nm）变化探讨了反应时间对ONOO-检测荧光强度信号的影响（图5）。
2.4.2 pH的影响
pH是影响荧光强度的重要参数之一，实验考察了pH 4.0～10.0 的PBS缓冲溶液（0.01 mol/L）中 1.0×10-5 mol/L TPE-BCO与 1.4×10-5mol/L 的ONOO-的响应情况（图6）。
3 结论
