QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定牦牛肉中多种抗生素残留
李增明a,b，解玉龙a,c，马春光b
（青海民族大学a. 化学化工学院，b. 西宁市疾病预防控制中心，c. 青海省纳米材料与技术重点实验室，青海 西宁 810007）
背景介绍
兽药的广泛应用能够有效地降低在畜牧业养殖过程中动物疾病的发生和传染病的扩散，也有诊断和治疗疾病的作用。但是兽药的滥用和乱用也会在动物体内产生残留，人体食用后会对健康产生不利的影响。因此建立高效、简单、可靠、环保的动物源食品中兽药残留的检测方法十分重要。本研究对 QuEChERS前处理技术和超高相液相色谱质谱联用技术（UPLC-MS/MS）的条件进行了改良和优化，建立了牦牛肉中3类31种兽药残留的检测方法。
文章亮点
1、建立了氨基化多壁碳纳米管和C18为净化剂的QuEChERS 前处理技术和超高相液相色谱质谱联用技术（UPLC-MS/MS）结合测定31种抗生素残留的方法，并且该方法简单、可靠、高效、稳定；
2、牦牛为高原特有物种，其肉具有“肉类之冠”的美称，牦牛肉中的抗生素类的残留在文献中报道较少，本文以牦牛肉为研究对象，测定31种兽药残留为今后对牦牛肉的研究具有重要的意义。
内容介绍
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1.2 方法
1.2.1 基质匹配标准曲线的制备
1.2.2 样品的制备及提取
1.2.3 样品的净化
1.2.4 色谱及质谱条件
1.2.4.1 色谱条件
色谱柱：Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流速：0.3 mL/min；柱温：30 ℃；进样体积：10 μL；流动相：A:0.1%甲酸水，B: 含0.1%甲酸的V（甲醇）: V（乙腈）=2:8梯度洗脱，梯度列表见表1。
1.2.4.2 质谱条件
离子化模式：电喷雾正离子模式（ESI+）；质谱扫描方式：多反应离子检测（MRM）；毛细管电压：2.0 KV；离子源温度：150 ℃；脱溶剂气温度：450 ℃；脱溶剂气流量：800 L/Hr；其他质谱参数见表2。
2 结果与讨论
2.1 样品前处理条件的选择和优化
2.1.1 提取剂的选择
本研究中涉及的31种抗生素包含四环素类、喹诺酮类、磺胺类等化合物，种类多，化学性质和结构差异较大。
2.1.2 除水剂的选择
本实验中使用的除水剂分别为无水硫酸镁、无水硫酸钠、氯化钠。
2.1.3 净化剂的选择
本研究对比了氨基化多壁碳纳米管、PSA、C18、和NH3 4种净化剂对31种目标化合物的净化效果。
2.2 方法确认
2.2.1 线性关系及检出限
采用样品空白基质和标准工作液进行标准曲线的制作。以目标化合物定量离子的峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标绘制空白基质曲线，得到线性回归方程。所有目标化合物相关系数r>0.9950，表明目标化合物在相应的浓度范围内线性关系良好。
2.2.2 回收率及精密度
在牦牛肉空白样品中分别添加20、100和200 μg/ kg水平的标准物质，分别进行6次平行添加回收试验，以标准曲线定量，四环素类的回收率范围为67.0%~126.0%，相对标准偏差范围为2.11%~10.10%，喹诺酮类的回收率为63.0%~111.0%，相对标准偏差范围为0.69%~11.50%，磺胺类的回收率为64.4%~111.0%，相对标准偏差范围为1.44%~8.71%，结果表明该方法具有良好的回收率和重复性。
2.3 实际样品的检测
本研究采集了50份牦牛肉作为实际样品，牦牛肉均采自于西宁市四区的各大农贸市场，同时作空白样品加标样（100 μg/kg）进行质量控制，结果显示2号、10号、18号样品依诺沙星为15.5、8.4、8.4 μg/kg，11号样品磺胺甲嘧啶2.1 μg/kg，阳性样本碎片离子色谱图如图4所示，根据国标GB31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》均小于国家限量。
3 结论
本研究建立了基于氨基化多壁碳纳米管的QuEChERs结合超高效液相色谱-串联质谱技术测定牦牛肉中31种抗生素残留的方法，具有样品前处理快速简捷、检测分析结果灵敏度高，准确度好，适用于牦牛肉中多种兽药残留的检测。该方法能够满足牦牛肉中兽药残留相关安全检测要求，为动物源食品兽药残留检测提供方法参考。
引用本文:李增明，解玉龙，马春光. QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定牦牛肉中多种抗生素残留[J].化学试剂，2024,46（6）：99-106.
DOI:10.13822/j.cnki.hxsj.2023.0832
