1.2  实验方法

1.2.1  供试品溶液制备

1.2.2  标准品溶液制备

分别精密称取10.65、10.39、10.05、9.80、10.63、10.43 mg朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ标准品于250 mL容量瓶中，用70%甲醇溶液超声溶解后稀释定容至刻度，混匀后作为标准品储备液，5 ℃冰箱保存。

1.2.3  色谱条件

2.1  指纹图谱方法学考察

2.2  指纹图谱的建立及相似度评价

经多点校正后全谱峰匹配，得到24批淫羊藿样品的叠加图谱见图1，共标定9个共有峰。如图2所示，经与混合对照品溶液HPLC图谱比对，确认1号峰为朝藿定A、2号峰为朝藿定B、3号峰为朝藿定C、5号峰为淫羊藿苷、8号峰为淫羊藿次苷Ⅰ、9号峰为宝藿苷Ⅰ。

2.3  化学计量学分析

使用SPSS 26.0版软件，以24批淫羊藿指纹图谱的9个共有峰峰面积为变量，采用组间平均连接法，以平方欧氏距离作为测量度，对24批药材采用系统聚类分析法进行模式识别分析，结果见图3。

使用SIMCA 14.1统计软件对S1～S24淫羊藿样品的9个共有峰峰面积进行正交偏最小二乘法分析，从而揭示不同品种淫羊藿之间的主要差异成分（图4）。

如图5所示，变量重要性指标(Variable Importance in Projection，VIP)值大于1的成分共有5个，表明这5类成分为不同品种淫羊藿之间的主要差异性成分。

2.4  多指标定量方法学考察

2.5  样品含量测定

各取0.20 g S1～S24批淫羊藿样品，按照1.2.1方法制备供试品溶液，以1.2.3的色谱条件进样分析，每个样品分别检测3次，得到各峰峰面积并计算淫羊藿苷等6种指标成分的含量。

2.6  讨论

2.6.1  精密度实验

本研究以2020版中国药典中淫羊藿的总黄酮醇苷项的含量检测方法为基础，分别考察了超声提取时提取溶剂（水、50%甲醇、70%甲醇、甲醇、50%乙醇、70%乙醇、乙醇）和提取时间（30、60、90 min）对实验的影响，确定了淫羊藿指纹图谱的最佳分析条件，能够较为全面地体现出淫羊藿中的化学成分信息。

2.6.2  精密度实验

本研究增加了淫羊藿苷的活性代谢物淫羊藿次苷I、宝霍苷I作为指标成分，基于HPLC分析方法建立了4个药典品种淫羊藿的多指标定量指纹图谱，并结合化学计量学综合评价淫羊藿药材，从而完善淫羊藿质量控制和评价体系。