1.1 主要仪器与试剂

1.2  仪器条件

1.3  标准系列溶液的配制

混合标准中间液：准确称取人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rd、Rb1、Rb2对照品适量，用甲醇定容，配制成10.0 µg/mL的标准溶液，-18℃冰箱避光保存。

混合标准工作液：根据需要将混合标准中间液，用V（0.1%甲酸水）：V（乙腈）=9：1稀释成浓度为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 µg/L的混合标准工作液。

1.4  样品前处理

2 结果与讨论

2.1 色谱柱的选择

6种人参皂苷（Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1）的分子结构相类似，其中Re和Rd的分子量相同，Rb2和Rc互为同分异构体，为了使目标物分离的更好，色谱柱的选择也很重要，其填料会影响测定结果的准确度，人参皂苷的水溶性较差，C18色谱柱具有较强的疏水性，这对人参皂苷的保留能力及分离效果更好一点^[16]，且在较低的pH下，C18柱的固定相具有更强的疏水性，可以更好的分离疏水性化合物，所以选用C18的色谱柱。

2.2 液相条件优化

2.3 色谱条件的优化

   通过优化流动相梯度洗脱、进样量、流速等条件得到最佳的色谱条件，尝试不同时间不同浓度梯度洗脱，发现时间长且高浓度梯度洗脱时，6种人参皂苷成分响应及分离程度较好，优化色谱条件后，不仅提高了方法的灵敏度，而且较完全分离了具有相同分子量的异构体Rb2和Rc以及其他物质，实现对人参皂苷成分的高效分离和准确检测。图7是不同洗脱条件下的TIC图。

2.4  质谱条件的优化

通过总离子流响应程度和离子峰响应值的强度选择最优质谱参数^[21]，首先对目标物质进行Q1模式扫描，选择负模式，输入离子范围，找到母离子；然后用MS2模式扫描，输入母离子数，碰撞母离子打成碎片，找到子离子，再选择最佳DP，以保证母离子的传输效率；最后在MRM模式下输入母离子和子离子以及DP，找到最优的CE，主要通过优化DP和CE质谱参数使离子化效率达到最佳。

2.5 标准曲线、检出限和定量限

准确移取6种人参皂苷的混合标准中间液，用V（0.1%甲酸水）：V（乙腈）=9：1配制成0.2 ~100 µg/L的混合标准工作液，在给定的仪器条件下进行液相色谱-串联质谱测定，并绘制标准曲线^[22-26]。结果如表3所示，6种人参皂苷呈现出良好的线性关系，相关系数r在0.999以上。根据最低添加浓度的信噪比数据，分别确定人参皂苷的检出限（LOD）与定量限（LOQ）。    

2.6  重复性和稳定性

2.7  准确度和精密度

   用3种空白基质（乳液，膏霜、面膜）配置成混合标准工作液，浓度水平分别为5、10、20 μg/kg，每个浓度水平重复测量6次，计算其准确度和精密度。乳液的平均回收率为87.1%~98.0%，相对标准偏差（RSD）为0.36%~2.85%，膏霜的平均回收率为 86.8%~97.8%，RSD为0.38%~3.31% ，面膜的平均回收率为88.0%~96.3%，RSD为0.76%~2.89%，从结果可以看出，3种化妆品类的RSD均小于5%，且平均加标回收率均大于80%，用该方法对进口人参类化妆品中的6种人参皂苷进行定性定量分析，灵敏度高、重现性好，且具有较高的精密度和准确度，能够满足检测要求。相关结果见表5。

3   结论

 本研究建立了进口人参类化妆品中乳液、膏霜、面膜3种基质的人参皂苷检测方法，采用有机相提取的前处理方式，以C18固相萃取柱为净化方法，应用高效液相色谱-串联质谱仪进行检测。对液相色谱和质谱条件进行了优化，提高了检测灵敏度和准确性，能够对人参类化妆品中6种人参皂苷进行准确的定性定量分析测定。经验证，6种人参皂苷在0.2~100 µg/L浓度范围内线性关系良好（r>0.9995），方法检出限在0.01~0.06 μg/kg，定量限在0.02~0.5 μg/kg，满足测定需求。对3种空白样品分别加标（5、10、20 μg/kg，n=6），乳液的平均回收率为87.1%~98.0%，RSD为0.36%~2.85%，膏霜的平均回收率为86.8~97.8%，RSD为0.38%~3.31%，面膜的平均回收率为88.0%~96.3%，RSD为0.76%~2.89%，3种化妆品的RSD均小于5%，且平均回收率均大于80%，说明用该方法对进口人参类化妆品中的6种人参皂苷进行定性定量分析，灵敏度高、重现性好，且具有较高的精密度和准确度。因此，本研究建立进口人参类化妆品中皂苷成分高效液相色谱-串联质谱，并应用于市售进口人参类化妆品的调查，为海关加强进口人参类化妆品的监管提供评估数据和技术支持。