啤酒花（Humulus lupulus L.）为桑科葎草属植物啤酒花的干燥雌花序，学名蛇麻，又被称为忽布、啤瓦古丽、蛇麻草等。主要分布在新疆北部，在我国云南、4川等地也有分布^[1]。啤酒花味苦、性平，能安神、利尿、止咳化痰、健胃消食，治疗失眠、肺结核、食欲不振等病，含有多酚、黄酮、多糖等多种化合物^[2]。多酚类化合物有抗氧化^[3]、抗肿瘤^[4]、抗菌^[5]等多种生物活性，主要应用在保健品^[6]、化妆品及医药领域中^[7]。

正文部分

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

1.2  实验方法

1.2.1  啤酒花总多酚的提取

将干燥啤酒花粉碎，过60目筛，精密称取适量粉末于锥形瓶中，按料液比、乙醇浓度、提取时间等因素超声提取，离心备用^[10]。

1.2.2  啤酒花总多酚的含量测定

1.2.3  啤酒花总多酚的响应面试验

1.2.3.1  单因素试验

根据课题组的前期研究^[11]，将提取温度定为40 ℃，超声功率设置为100 W，以啤酒花总多酚提取率为参照，研究乙醇浓度、提取时间、料液比对啤酒花总多酚的影响。

1.2.3.1.1  乙醇浓度的筛选

精密称取啤酒花粉末，固定料液比为1:20，提取时间为40 min，乙醇浓度设为50%、60%、70%、80%、90%进行超声提取。按总多酚含量测定及提取率公式，计算啤酒花总多酚的提取率。

1.2.3.1.2  提取时间的筛选

称取适量啤酒花粉末，按料液比1:20（g/mL），乙醇浓度60%，提取时间10、20、30、40、50 min超声提取，并计算提取率。

1.2.3.1.3  料液比的筛选

精密称取适量啤酒花粉末，按乙醇浓度60%，提取时间40 min，料液比1:10、1:20、1:30、1:40、1:50（g/mL）条件进行超声提取，测定总多酚含量并计算提取率。

1.2.3.2  响应面优化设计

参考单因素试验的结果，将乙醇浓度、提取时间、料液比定为因变量，啤酒花总多酚提取率定为响应值，设计因素水平表，如表1所示。

1.2.4  啤酒花总多酚抗氧化活性的测定

1.2.4.1  DPPH自由基清除能力的测定

1.2.4.2  还原能力的测定

2  结果与讨论

2.1  总多酚的标准曲线

按1.2.2中的方法绘制标准曲线：y = 4.3372x-0.0414，R² = 0.9991，如图1所示。

2.2  单因素实验结果

2.2.1  乙醇浓度对啤酒花总多酚提取率的影响

2.2.2  提取时间对啤酒花总多酚提取率的影响

2.2.3  料液比对啤酒花总多酚提取率的影响

2.3  响应面实验的结果与分析

通过Design-Expert 11软件的分析，得到响应面实验设计结果，如表2所示。

2.4  不同产地啤酒花总多酚提取率的对比

用最佳工艺提取4种产地的啤酒花总多酚，计算提取率，如图6。其中，新疆啤酒花总多酚的提取率最高为（62.86%±1.0），云南的提取率为（60.09%±1.0%），广西的提取率为（55.25%±2.0%），安徽的提取率仅有（45.43%±1.5%）。这种差异可能与生长环境及气候的不同有关，啤酒花对光照的要求较高，新疆属于温带大陆性气候，昼夜温差大、光照时间长，更适宜啤酒花的生长，因此总多酚的提取率也会相对较高。

2.5  抗氧化性分析

2.5.1  对DPPH自由基清除能力的测定

本试验考察了4个产地的啤酒花对DPPH自由基的清除能力，如图7所示，维生素C和啤酒花总多酚对DPPH自由基的清除能力与样品浓度呈正比。当浓度为1.0 mg/mL时，VC的清除率为89.58%，4个产地的啤酒花清除率均低于VC，其中新疆＞云南＞广西＞安徽；研究认为，DPPH自由基的清除率与总多酚含量有关，而总多酚含量又受生长环境的影响，新疆啤酒花中总多酚含量最高，因此清除DPPH自由基的能力最强。虽然啤酒花总多酚的清除率低于VC，但仍具有一定的抗氧化能力。

2.5.2  还原能力的测定

本试验考察了不同产地啤酒花对Fe³⁺的还原能力，如图8所示，随着样品浓度的升高，VC和啤酒花总多酚对Fe³⁺的还原能力也在升高。不同产地啤酒花总多酚的还原能力均低于相同浓度的VC，新疆啤酒花的还原能力最强，安徽的最弱，不同产地啤酒花总多酚的还原能力存在一定的差异，此差异与啤酒花总多酚含量呈正比，说明总多酚含量越高，还原能力越强。 

3  结论