醉鱼草总黄酮的提取及抗氧化活性研究
(哈尔滨商业大学省预防治疗老年病药物研究重点实验室财政部中央与地方共建实验室，黑龙江哈尔滨 150076)
摘要
以醉鱼草为对象，选择料液比、超声功率、微波功率和提取时间进行单因素实验，以单因素试验结果为参考利用响应面试验设计对超声波-微波联合提取醉鱼草中总黄酮的工艺进行筛选优化，并对DPPH自由基及羟自由基进行体外抗氧化活性研究。修正最佳工艺条件为：料液比1：48 （g/mL），超声功率389 W，微波功率446 W，提取时间45 min。试验测得总黄酮得率为12.212%，与预测值12.247%相接近。在0.05～0.30 mg/mL的浓度范围内，醉鱼草总黄酮对DPPH自由基及羟自由基均有较强的清除作用，表明其具有一定的抗氧化能力。因此，响应面法优化超声波-微波提取醉鱼草总黄酮的工艺研究具有可行性，为醉鱼草的综合利用及形成产业化提供一定的理论及技术支持。
引言
醉鱼草（Buddleja lindleyana fort）为醉鱼草属马钱科植物，广泛生长于我国长江以南地区，马来西亚、美洲和非洲也均有栽培[1]。常用于皮肤红疹、瘙痒、烧伤烫伤、清热解毒等，是一种民间常用的中药材[2]。醉鱼草中含醉鱼草苷、洋芹素、蒙花苷等多种黄酮类成分[3]。黄酮类物质是一种自然馈赠给我们的天然产物资源，具有多种对人体有益的功能，包括抑菌抗氧化[4]、消炎止痛[5]、调节免疫功能[6]、神经调节[7]、抗肿瘤[8]等。目前，有关黄酮方面的应用也越来越多，包括食物色素的添加，食品贮藏的保鲜抗菌抗氧化，以及化妆品等多方面的应用[9]。研究表明醉鱼草中含有大量的黄酮类物质，是良好的提取原料[10]。
正文部分
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1.2 实验流程与方法
1.2.1 醉鱼草总黄酮提取流程及工艺
1.2.2 醉鱼草总黄酮含量测定方法
1.2.3 醉鱼草总黄酮的响应面提取优化工艺
1.2.3.1 单因素实验
以醉鱼草总黄酮提取率为参照标准，分别对醉鱼草粉末的料液比、设置的超声波功率、微波功率以及提取时间进行筛选，确定最佳提取条件。
1.2.3.2 响应面优化设计
参照1.2.3.1的实验结果，以醉鱼草总黄酮提取率为参照标准，进行响应面设计优化。
1.2.4 醉鱼草总黄酮体外抗氧化活性测定
1.2.4.1 清除氮自由基（DPPH）能力的测定
1.2.4.2 清除羟自由基能力的测定
2 结果与讨论
2.1 单因素实验结果
2.1.1 料液比的筛选
精密称取适量的醉鱼草烘干粉末，提取液用95%乙醇，按照料液比1：10、1：20、1：30、1：40、1：50（g/mL）添加至超声波-微波辅助提取仪中，设置超声功率为300 W、微波功率为300 W、提取时间为30 min。参照1.3.2流程及计算公式计算得出醉鱼草总黄酮提取率，如图1所示。
2.1.2 超声功率的选择
精密称取适量醉鱼草烘干的粉末，提取液用95%乙醇于超声波-微波辅助萃取仪中以料液比1：30（g/mL），设置超声功率为100、200、300、400、500 W、微波功率300W提取30 min。参照1.2.2流程及计算公式计算得出醉鱼草总黄酮提取率，如图2所示。
2.1.3 微波功率的选择
精密称量适量醉鱼草烘干的粉末，提取液用95%乙醇于超声波-微波辅助萃取仪中以料液比1：30（g/mL），超声功率300 W，设置微波功率为100、200、300、400、500 W提取30 min。参照1.2.2流程及计算公式计算得出醉鱼草总黄酮提取率，如图3所示。
2.1.4 提取时间的选择
精密称量适量醉鱼草烘干的粉末，提取液用95%乙醇于超声波-微波辅助萃取仪中以料液比1：30（g/mL），设置超声功率300 W，微波功率300 W，提取10、20、30、40、50 min。参照1.2.2流程及计算公式计算得出醉鱼草总黄酮提取率，如图4所示。
2.2 响应面结果与分析
以单因素实验取得的结果,制定响应面实验的因素水平表，如表1所示。
2.3 抗氧化分析
2.3.1 DPPH自由基清除作用
醉鱼草总黄酮和Vc对氮自由基（DPPH）的清除作用如图6所示。
2.3.2 羟自由基清除作用
醉鱼草总黄酮和Vc对羟自由基的清除作用如图7所示。
3 结论
结论
引用本文：赵雨晴，王宝庆，徐汉，等. 醉鱼草总黄酮的提取及抗氧化活性研究[J].化学试剂, 2021, 43(7):979-985.
