银杏叶提取物中组分定性检测及含量测定
(贵州大学 a. 药学院;b.贵州省生化工程中心,贵州贵阳 550025)
摘要
通过显色反应实验和泡沫实验对银杏叶提取物中组成成分类别进行定性测试,并采用ΜV法和高效液相色谱法测定银杏叶提取物中成分含量。银杏叶提取物均含有黄酮、有机酸、多糖、蒽醌、鞣质、萜类化合物、无皂苷和生物碱类化合物(去掉了各成分含量范围)。两种银杏叶提取物中黄酮、有机酸、多糖、蒽醌、萜类化合物含量相差不大,鞣质含量在2015年版药典银杏叶提取物中高于水溶性银杏叶提取物。对银杏叶提取物质量整体评价及安全、稳定性研究提供数据参考。
引言
银杏(GinkgobiLoba)又名白果树、公孙树,素有“活化石”、“植物界的熊猫”之称,是我国特有的最古老树种之一,约占世界总量的70%[1],我国将其列为国家重点保护植物[2,3]。银杏叶具有活血化瘀、化浊降脂、敛肺平踹、止痛抗氧化等作用[4],对高血压、动脉粥样硬化、脑功能障碍等心脑血管疾病功效显著[5-13]。武文君等[14]研究发现银杏茶含有一定的保健物质和风味物质,具有保健作用。现临床上,大多将银杏叶制剂广泛应用于治疗心脑血管疾病,被认为是治疗心血管疾病和神经系统疾病的双跨性药物,并具有缓解老年人群认知障碍的作用[15-19]。银杏叶提取物为全球天然植物药物提取物药用价值最大的品种之一,它被制成各种剂型,有片剂、颗粒剂、胶囊、滴丸、口服液、糖浆剂、丸剂和注射剂等[20],涉及到的给药途径有口服和注射,其提取物被运用到医药、化妆品、保健品等各方面。黄酮醇苷和萜类内酯被视为银杏叶及其提取物中的主要活性成分[21]。早在1997年德国药剂师K·H·斯通弗对银杏叶提取物的构成成分进行了分析,但不够明确具体,通过部分银杏叶提取物成分与用银杏叶提取物制成的产品梯波宁的药理分布比较发现,银杏叶提取物中除了黄酮、萜内酯外,其他成分也有作用[22]。目前,国内外银杏叶提取物及其制剂的质量标准主要测定黄酮、萜内酯及银杏酸含量。而对银杏叶提取物及其制剂中其他活性成分研究较少,对其质量控制缺乏必要的全面性和准确性。
因此,对银杏叶提取物中其他活性成分进行定性测试,并对其含量进行测定,为银杏叶提取物合理开发利用及其药用物质基础研究提供数据参考。
结论
本文研究表明,银杏叶提取物中含有多糖、有机酸、黄酮、萜内酯、鞣质和蒽醌类化合物,但无生物碱和皂苷类化合物。2015年版药典银杏叶提取物中黄酮含量24%~26.74%,水溶性银杏叶提取物中黄酮含量28.2% ~ 35.96%,水溶性银杏叶提取物中黄酮约高于2015年版银杏叶提取物,但黄酮和萜内酯含量均满足2015年版药典质量要求,鞣质在2015年版银杏叶提取物中含量远高于水溶性银杏叶提取物中含量,这可能与水溶性银杏叶提取物制备中有降糅质工艺有关,其他成分的含量在两种银杏叶提取物中含量相当。
目录
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1.2 实验方法
1.2.1 银杏叶提取物组成成分的定性检测
称取不同批次的2015年版银杏叶提取物和水溶性银杏叶提取物各0.10 g,加30 mL甲醇,超声溶解、过滤,得到供试品溶液。
1.2.2 银杏叶提取物组成成分的定量测定
(1)紫外可见分光光度计法
(2)高效液相色谱定量测定方法
1.3 方法学考察
1.3.1 精密度
分别精密吸取银杏叶提取物及银杏黄酮供试品溶液3份,按上述两种方法操作6次,分别测定吸光度值和峰面积并计算RSD值,结果显示RSD值均小于0.98%,表明各测定方法精密度良好。
1.3.2 重复性
精密称取上述同一样品3份,先按照不同的供试品溶液配制,再分别按照上述两种方法操作,分别测定吸光度值和峰面积并计算RSD值,结果显示RSD值均小于1.2%,表明各测定方法重复性良好。
1.3.3 紫外分光度计测定线性关系考察
以标品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,R2>0.99有良好的线性相关性,见表1。
吸取上述不同的供试品溶液,分别放置6、12、18、24、30、36、42、48 h后分别按上述两种方法操作,分别测定吸光度值和峰面积并计算RSD值,RSD值均小于1%。结果显示样品在48h内吸光度值和峰面积表现为基本稳定,表明样品在48 h内稳定性良好。
2 结果与讨论
2.1 定性检测结果
由表2可知,银杏叶提取物中黄酮、有机酸、蒽醌、萜类、多糖和鞣质类化合物检识反应呈阳性,而皂苷和生物碱类检识反应呈阴性。
2.2 定量测定结果
3 结论
