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【45周年专辑Ⅱ】武汉工程大学古双喜等:水溶性荧光探针在氨基酸分子识别中的研究进展

引用本文:余康,许志勇,安建平,等.水溶性荧光探针在氨基酸分子识别中的研究进展[J]. 化学试剂,2024469:53-65.


DOI:10.13822/j.cnki.hxsj.2024.0284.

0284水溶性荧光探针在氨基酸分子识别中的研究进展.pdf

背景介绍


氨基酸作为构成生物体的重要分子之一,其不仅是蛋白质的组成单元,也是细胞构建和组织修复的基础物质。另外,氨基酸也是一种重要的手性物质。不同种类,以及同一种类但不同构型的氨基酸,都各自发挥着不同的作用。氨基酸类别和手性构型的识别与分析不论是在生物医学领域,还是在以氨基酸为手性前体和手性配体的不对称合成领域,都具有重要的研究意义。由于天然存在的氨基酸大多具有良好的亲水性,因此水相中对氨基酸的识别尤为重要。




文章亮点

1对近五年应用于水相中氨基酸分子识别的荧光探针研究进展进行了综述;

2以氨基酸的化学选择性识别和对映选择性识别这两类进行了分类综述,并且每一类中均按氨基酸的类别进行细分;

3. 对水相中氨基酸分子识别的荧光探针研究重点和要解决的关键问题进行了总结,并对未来的研究方向进行了分析与阐述。




内容介绍

1  氨基酸的化学选择性识别与分析

1.1  半胱氨酸(Cysteine, Cys

Cys是组成蛋白质的一种重要亲核性氨基酸,在维持生物系统的稳定中发挥着重要的作用。研究发现,细胞内的Cys水平异常与许多疾病有关,如生长迟缓、心血管疾病、阿尔茨海默症以及癌症[1,17],因此生物体中Cys的检测对相关疾病的诊疗具有重要意义。

1.2  苯丙氨酸(phenylalaninePhe

苯丙氨酸是人类和动物自身无法合成的一种必需芳香族氨基酸。苯丙氨酸还是酪氨酸、多巴胺、黑色素、肾上腺素和苯丙酮酸的前体[28]。体内苯丙氨酸含量过高会导致中枢神经系统损伤以及肝损伤,也会导致苯丙酮尿症[29]。因此苯丙氨酸的分析与监测也十分重要。

1.3  天冬氨酸(aspartic acidAsp

天冬氨酸是谷氨酸和甘氨酸的前体[31],也是中枢神经系统中一种主要的兴奋性神经递质,过量的天冬氨酸可导致中风、癫痫等疾病。因此天冬氨酸的分析和检测对此类疾病的研究具有重要意义[32]

1.4  精氨酸arginineArg

精氨酸被认为是人类非或半必需氨基酸,其广泛参与多种生理过程,例如体内一氧化氮和多胺的合成、以及作为mTOR酶的激活剂等。此外,精氨酸还是癌变过程中的信号代谢物、表观遗传调节剂和治疗靶点[36]。因此,精氨酸的化学选择性识别对癌症的发现和治疗具有积极作用。

1.5  谷氨酸(glutamic acidGlu

谷氨酸是大脑的主要神经递质,谷氨酸的细胞平衡对大脑的正常功能至关重要。谷氨酸的清除中断会导致神经元过度刺激和兴奋性毒性,最终导致神经系统疾病[39]。因此,生物体内谷氨酸的化学选择性识别有利于对由谷氨酸水平异常引起的神经系统疾病的研究。

2  氨基酸的对映选择性荧光识别与分析

2.1  赖氨酸(lysineLys
赖氨酸是一种人体必需的氨基酸,L-赖氨酸不仅参与脂肪酸代谢和矿物质营养素摄取等过程,还在中枢神经系统中发挥着重要作用[2]D-赖氨酸已被用于合成黄体生成素-释放激素类似物,或以聚赖氨酸的形式作为药物载体[3]。因此,赖氨酸的对映选择性识别与分析具有重要意义。
2019年,Du[42]使用(乙二醇)甲基醚嵌段聚(L-丙交酯)制备胶束包封(S)-19的水溶性探针ML-(S)-19(图19),探针ML-(S)-19能够在水溶液中对氨基酸进行对映选择性检测。探针ML-(S)-19在碳酸盐缓冲溶液中(pH 10.1)仅对赖氨酸具有强的荧光增强,且对其还显示出明显的对映选择性荧光响应,其对映选择性荧光增强比(ef ΔID/ΔIL)为6.6。结果表明,探针ML-(S)-19在水相中对赖氨酸同时具有化学选择性和对映选择性的识别能力。

2.2  精氨酸(arginineArg

精氨酸是人体半必需的氨基酸,L-精氨酸参与宿主免疫反应、尿素循环和一氧化氮的产生等生理过程[43]D-精氨酸具有中枢兴奋作用,还能够诱导苯巴比妥引起的睡眠时间延长[44]因此,Arg的对映选择性分析对手性精氨酸参与的生理活动的研究具有积极的作用。

2.3  谷氨酸(glutamic acidGlu

L-Glu是神经系统中的一种神经递质,控制大脑的认知过程,也是柠檬酸循环的必需化合物,D-Glu的生物功能虽少有报道,但其光学纯的物质常被用作不对称合成的手性前体和手性催化剂配体[49,50]。因此,Glu的手性识别与分析也备受关注。
2.4  色氨酸(TryptophanTrp

色氨酸是人体必需氨基酸之一在生物的生命活动中具有重要作用。L-色氨酸是血清素、褪黑素和烟酸的合成前体,而D-色氨酸可以作为免疫制剂的重要中间体,在医药工业中广泛应用[4]因此,色氨酸的对映选择性检测具有重要意义。


3  总结与展望

基于以上综述可知,应用于氨基酸分子识别的水溶性荧光探针的研究工作主要集中在两个方面,一是探针分子的亲水性结构改造,二是探针对氨基酸分子识别的应用范围拓展。在亲水性分子结构改造方面,主要有以下三种策略:(1)亲水性片段的引入,包括亲水性盐如磺酸盐、季铵盐等片段,以及亲水聚合物,如聚乙二醇片段等;(2)基于分子包裹的策略提高疏水性探针分子的水溶性;(3)亲水性碳点的合成。在这三种策略中,亲水性片段的引入是一种最直接的分子改造方法,这种方法不改变探针分子原有的骨架结构及识别基团,研究的也是最多的。分子包裹策略往往要同时考虑被包裹的探针分子对氨基酸底物的识别活性基团要有效地裸露在外相,或者氨基酸能进入包裹分子内部,否则将影响探针对水相中氨基酸的分子识别能力。另外,应用于氨基酸对映选择性分子识别的水溶性荧光探针的构建具有更大的挑战性,原因是在分子设计中除了要考虑探针分子的亲水性及与氨基酸作用后的荧光响应变化,还同时要考虑探针分子刚性的手性结构及对其中一种构型的氨基酸的手性偏倚。以上三种策略中,包裹性亲水结构改造的方法往往会将探针的主体手性骨架包裹在内部,如果氨基酸是在外相与探针分子的识别基团作用,此时,探针分子对氨基酸的对映选择性识别能力将会大大降低。在水相中荧光探针对氨基酸的分子识别应用方面,目前的研究主要是对氨基酸的化学选择性识别的应用,包括溶液体系中的化学选择性识别,溶液中氨基酸浓度的定量测定,细胞中内源性及外源性氨基酸的成像,血浆中、食品中氨基酸的检测等。而水相中氨基酸的对映选择性识别的应用基本上都是局限于溶液体系中对氨基酸的手性的识别以及光学组成的测定,很少有细胞和生物体内氨基酸手性荧光识别的研究报道。

从本文综述的研究进展来看,提高探针分子水溶性的同时,增强探针对氨基酸的化学选择性及对映选择性荧光响应始终是最关键的问题,也是以后研究的核心问题。另外,基于实际应用的氨基酸分子识别的荧光探针构建将是该领域科学家们关注的热点。从溶液中氨基酸的分子识别到细胞及生物体内氨基酸荧光成像的应用拓展是该领域的一个重要研究方向。特别是已经有越来越多的研究发现在人体组织和体液中有少量D-氨基酸的存在,且其与某些疾病的发病机制有关,因此细胞及生物体内氨基酸的对映选择性分子识别及手性荧光成像将是一个值得关注的新兴研究方向。



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